金年会金字招牌至上网站推出猪瘟病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法），以下为该产品的使用说明。

产品概述

产品名称：猪瘟病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名：Test Kit for Antibodies to Classical Swine Fever Virus (ELISA)
包装规格：96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒

预期用途

猪瘟是一种由猪瘟病毒（Classical Swine Fever Virus，CSFV）引起的、具有高度接触性、出血性和致死性的传染病，临床表现为高热、广泛出血、坏死及梗塞等情况。此试剂盒用于检测猪血清中的猪瘟病毒抗体，可评估疫苗的免疫效果。

原理

本试剂盒由预包被猪瘟病毒重组E2蛋白的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成，采用酶联免疫法（ELISA）原理检测猪血清或血浆样本中的猪瘟病毒抗体。实验过程中，通过对照血清和待测样本的温育，若样本中含有抗体，则将与酶标板上的抗原结合。洗涤后，再加入酶标记物，与抗原抗体复合物发生特异性结合。最终加入底物液，形成与抗体含量成正相关的颜色反应，经过终止液处理后即可在450nm测定样品中是否含有猪瘟病毒抗体。

储存及有效期

本试剂需在2～8℃条件下保存，有效期为12个月。开封后的包被板应避免潮湿，需在2～8℃避光保存，使用期限为2个月。

适用仪器

适用于含450nm、630nm波长的酶标仪、37℃恒温设备和可调微量移液器。

样品准备

1. 按常规方法制备动物全血血清，确保血清清亮、无溶血和污染。样品在1周内可在2～8℃保存，长期需在-20℃储存。
2. 待检血清需稀释40倍（例如：5μl血清加入195μl稀释液中混匀），阴性和阳性对照不需稀释。
3. 浓缩洗涤液使用前需恢复至室温，稀释为工作洗涤液（用蒸馏水或去离子水按20倍稀释）。

检验方法

1. 使用前将试剂盒在室温下放置30分钟。
2. 取所需酶标板条，设阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封、冷藏。
3. 加入阴、阳性对照各100μl，样品孔中加入稀释后的样品100μl。
4. 混匀后，盖好盖板膜，在37℃（推荐水浴）避光反应30分钟。
5. 清洗孔内液体，加入350μl工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次。
6. 每孔加入酶标记物100μl，再在37℃避光反应30分钟，随后洗涤。
7. 逐孔添加底物液A、底物液B各50μl，混匀，盖好盖板膜，在37℃避光反应10分钟。
8. 最后加入终止液50μl，混匀并在450nm（可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值。

结果判定

1. 样品的OD值（ODS）；
2. 阈值计算：SP值=（ODS-ODNC）/（ODPC-ODNC），SP值≥0.2判定为阳性，SP值<0.2判定为阴性。
3. 若结果为阴性，表示猪只抗体水平不足，建议补打相应疫苗。

注意事项

1. 实验操作需穿戴手套、工作衣，严格执行消毒隔离制度，废弃物应按传染物处理。
2. 终止液具有腐蚀性，应及时用大量水冲洗皮肤或衣物。
3. 酶标板取出后需恢复至室温，可与干燥剂一起保存。
4. 使用浓缩洗涤液前需恢复至室温以避免结晶。
5. 洗涤时确保各孔均加满液体。
6. 检测样品应保持新鲜。
7. 实验结果以酶标仪读数为准。
8. 不同批号的试剂不得混用。

使用金年会金字招牌至上网站的产品，可以有效地帮助您完成猪瘟病毒抗体的检测，确保猪只的健康和生产安全。